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645A-白膜層分(fèn)離及核酸提取(qǔ)自(zì)動化方(fāng)案(àn)-(貝克曼)
生物(wù)技術的飛速發展,也讓生物資源(yuán)的利(lì)用更加精準和充分。人的血液是個巨大的寶庫,可以輔助疾病診斷與治療。隨著精準醫療的提(tí)出,個體化診斷、CART治療、單(dān)克隆抗體治(zhì)療等技術不(bú)斷成熟普及,血液的利用也越來越廣泛,尤其是特定成分的使用。血液經離心分離,從上到下,可以獲得(dé)血漿、白膜層和紅細胞等。其中,白膜層的分離需要專業的技術和熟練(liàn)的技巧,手工操作緩慢而繁瑣。
Beckman Biomek i5自動化工作站可以精準定位、快速分離白膜層,使(shǐ)流程標準化,消除不同(tóng)技術人員的操作差(chà)異,提高白膜層核酸提取的產量和質量,並實現高通量(liàng)樣品處理(lǐ)。
*掃描采血管條形碼記錄樣本信息
*拍照模(mó)塊對采血管進行拍照
*液麵分析係統(tǒng)對(duì)紅細胞層(céng)、血漿層和白膜層進(jìn)行高度分析
*分析結果上傳到Biomek軟件
*Biomek軟件根據分析係統結果進行液麵高度(dù)確認
*Biomek軟件根據白膜層高度,驅動(dòng)加樣器進行白膜(mó)層分離
Biomek i5自動化工作站。該款工作站配置了靈活8通道加樣器、1個(gè)斜側(cè)抓板機(jī)械手、渦旋振蕩模塊、吸頭(tóu)回放模塊以及(jí)拍照模塊。拍照和采血(xuè)管架模塊可(kě)根據需要進行拆卸(xiè),拆卸後可增加9個通用板位。分離96個樣本(běn)的白膜層(céng)需要(yào)約20min。
白膜層主要包(bāo)括(kuò)富含血小板區(qū)、富含(hán)淋巴細胞區(qū)、富含單核細胞區和富含粒細胞區,粘度較大,使用(yòng)1000ul寬口吸頭可以更好地吸取白膜層。
內置轉圈吸液模板,最大限度(dù)模擬(nǐ)手工吸取白膜(mó)層操作,提高分離效率。
磁(cí)珠法白膜層核酸提取流(liú)程
白膜層核酸提取台麵布局舉例。96個樣本的白膜(mó)層核酸提取所需耗材:
(1)2盒(hé)100Ou吸頭,分(fèn)別用於吸取試劑、白膜層(céng)和廢液。
(2)1盒20Oul吸(xī)頭,用於轉移洗(xǐ)脫後核酸。
(3)4個試劑槽,用於放置(zhì)各種裂解(jiě)液、洗滌液和洗脫液
(4)2個深孔板,分別作為提(tí)取板和廢液板。
(5)1個PCR板,用於存放提取後的核酸。
(6)1個磁力架,用於吸(xī)附磁珠。
Biomeki5 自(zì)動化工作站使用的耗材和試劑品牌開放,用戶可根據需要選(xuǎn)擇國產或進(jìn)口品牌的耗材和試劑,成本掌握在用戶手中。
靈活8通道移液器,每(měi)個通道(dào)均可獨立控製,間距可根據不同孔間距的耗(hào)材自動調整,可同時吸取不同體積的(de)液體。
斜側抓板機械手,實現工作站內及周邊耗材的搬運,斜側夾板屬性保(bǎo)證耗材搬運無局限性,充分利用台麵空間。
渦旋振蕩(dàng)模塊,振速0-180ORPM。模塊上帶有自動夾板(bǎn)器及感應裝置,樣品板在被夾板器固(gù)定後(hòu)才進行高速振蕩,過程安全可靠。
拍照模塊,具備兩(liǎng)個高清拍照鏡頭,可以對不同高(gāo)度的紅細胞層(céng)、白膜層(céng)、血漿層進行識別及定位,LED燈用於拍照過程的光補償。
獨立孔結(jié)構吸頭盒,每個吸頭都有獨立的存放(fàng)空間,可自動將用(yòng)過的吸頭回放至原吸頭盒的原孔中,不會發生氣溶膠交叉汙染,在實驗設(shè)計允許的情況可重複(fù)使用,節約(yuē)成本。
Table.1 白膜層核酸提取結果。起始樣本為8個(gè)白膜層樣本各200u利(lì)用 GenFind V2 核酸提取試劑盒通過磁珠法進行核酸提取,用Nanodrop檢(jiǎn)測核(hé)酸濃度和純度。從上表測得的結(jié)果可以看出,Biomek工作站(zhàn)提取核酸的濃度、純度良好。